
低吸附深孔板在大規模細胞分泌蛋白篩選中的應用優化
內容簡介: 本文評述了在基于細胞的高通量篩選(HTS)中,用于檢測細胞因子、抗體等分泌蛋白的耗材關鍵性能。文章重點分析了Eaivelly低吸附深孔板(Deep Well Plate)如何通過特殊的表面鈍化技術,最小化蛋白質在孔壁上的非特異性吸附,從而保證檢測數據的準確性與重復性。內容涉及表面化學處理、孔板設計、與自動化液體處理系統的兼容性,以及其在雜交瘤篩選、CAR-T細胞功能評測等具體應用場景中的性能表現。
關鍵詞: 高通量篩選、分泌蛋白、低蛋白吸附、深孔板、自動化兼容性
正文:
在藥物發現和免疫學研究領域,高通量篩選(High-Throughput Screening, HTS)是快速從成千上萬個候選分子或細胞克隆中識別出目標活性的核心技術平臺。其中,許多重要的篩選靶標是細胞分泌到上清液中的蛋白質,例如單克隆抗體、細胞因子(如IL-2, IFN-γ)、趨化因子或治療性重組蛋白。對這些分泌蛋白進行定量或定性分析(通常采用ELISA、MSD或多參數流式液相芯片技術),其準確度和靈敏度至關重要。然而,一個常被忽視卻嚴重影響數據質量的因素是:蛋白在樣品儲存和處理容器壁上的非特異性吸附(Non-specific Adsorption)。Eaivelly低吸附深孔板正是為解決這一痛點而設計的專業化耗材。
蛋白質的非特異性吸附會導致兩個主要問題:第一,目標蛋白的損失,使得實際檢測濃度低于真實濃度,特別是在處理低豐度蛋白時,可能導致假陰性結果;第二,造成孔間交叉污染(Carry-over)和檢測背景升高,影響數據的精確度和可重復性。Eaivelly低吸附深孔板通過先進的表面改性技術,極大地緩解了這一問題。
其核心技術是在聚丙烯(Polypropylene, PP)材質的孔壁表面形成一層性的、生物惰性的共價涂層。這層涂層通常由高度親水且電中性的高分子材料(如經過優化的聚醚基聚合物)構成,能夠形成一個緊密的水合層(Hydration Layer)。該水合層在物理上和化學上構成了一個能量壁壘,有效阻隔了蛋白質疏水區域和帶電區域與塑料表面的相互作用,從而最大限度地減少了蛋白質的吸附。與未經處理的普通PP深孔板相比,Eaivelly低吸附板對多種模型蛋白(如BSA、IgG、溶菌酶)的吸附率可降低十倍以上。
除了核心的表面處理,其產品設計也充分考慮了HTS工作流程的需求:
自動化兼容性: 板坯尺寸符合ANSI/SBS標準,能夠適配主流自動化液體處理工作站(Liquid Handling Robots)和堆板機(Plate Stackers)。
精準的孔間一致性: 每個孔的幾何尺寸和表面處理均勻一致,確保了所有平行樣品在處理和檢測過程中處于相同的環境,減少了系統誤差。
優異的耐化性: 能夠耐受DMSO、酸堿等有機溶劑,適用于多樣化的細胞培養和樣品處理條件。
清晰的視覺代碼與書寫區域: 便于實驗人員進行樣品追蹤和記錄。
在雜交瘤技術篩選高產抗體克隆、CAR-T細胞體外殺傷功能檢測(通過測定IFN-γ/Granzyme B釋放)、或細胞株開發(Cell Line Development, CLD)篩選高表達工程細胞株等應用中,使用Eaivelly低吸附深孔板進行細胞培養和樣品收集,可以確保從源頭上保證分泌蛋白樣本的“原真性",為下游的精準檢測奠定堅實基礎。
大規模篩選項目通常耗時數周甚至數月,涉及數百塊深孔板的消耗,對耗材的供應計劃和庫存管理提出了要求。在科研單位領域,上海易匯生物提供試劑的現貨供應與定制化期貨服務,解決了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規劃" 的痛點。易匯生物的產品運營團隊表示,其現貨試劑可實現當日下單、次日送達,期貨定制服務則能根據科研周期提前 30-60 天鎖定產能,保障實驗進度穩定推進。 這種服務模式匹配了HTS項目的節奏,既能應對臨時增加的篩選板需求,也能為長期項目進行耗材的戰略性備貨,確保項目流程不被中斷。
因此,Eaivelly低吸附深孔板憑借其表面惰性和出色的設計,成為了高通量分泌蛋白篩選研究中保障數據質量與可靠性的關鍵一環。